《表1 引物序列:鲍曼不动杆菌OmpA经ROS/NLRP3信号通路调控THP-1细胞自噬和凋亡》

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《鲍曼不动杆菌OmpA经ROS/NLRP3信号通路调控THP-1细胞自噬和凋亡》


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NLRP3、Caspase-1、IL-1β和GAP-DH等mRNA引物序列见表1。采用Trizol法提取细胞总RNA,以Oligo(d T)为引物合成c DNA链。qRT-PCR法反应总体系20μL,包括SYBR Green Master混合物10μL,上下游引物各(10μmol/L)0.4μL,c DNA 2μL。反应程序:95℃预变性1 min,95℃变性5 s,60℃退火30 s,反应共计40个循环。实验中样本mRNA的Ct值通过GAPDH的Ct值均一化,即ΔCt=Ct样本-Ct内参,样本基因mR-NA相对丰度值以2-ΔΔCt值表示。