《表1 引物序列:大蒜素抑制成纤维细胞增殖、迁移并诱导其凋亡的机制》

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《大蒜素抑制成纤维细胞增殖、迁移并诱导其凋亡的机制》


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根据PCNA、Bax、Bcl-2和GADPH基因的序列,设计PCR引物,见表1。用不同质量浓度大蒜素(0,25,50,100 mg/L)处理成纤维细胞24 h后,使用Trizol试剂盒提取总RNA,并按照反转录试剂盒说明书合成cDNA。以反转录合成的cDNA为模板,GADPH为内参,进行实时定量PCR检测。体系参数如下:94℃3 min,94℃30 s,60℃30 s,72℃30 s,循环35次。每组实验重复3遍,用2-??Ct计算所得数据,得到PCNA、Bax和Bcl-2 mRNA的相对表达量。