《表1 PCR引物序列：松果菊苷对人增生性瘢痕成纤维细胞TGF-β1/Smads信号通路影响的实验研究》

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《松果菊苷对人增生性瘢痕成纤维细胞TGF-β1/Smads信号通路影响的实验研究》

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细胞分组处理同1.2.1。ECH作用48 h后，收集细胞，将预冷的PBS清洗培养瓶2次后加1 ml Trizol充分吹打后冰上裂解5 min，加0.2 ml氯仿颠倒混匀，分光光度法测定其含量及纯度，测定D(260）/D(280）值。引物由上海生工生物公司合成（表1）。反应条件：95℃变性30 s，95℃变性5 s、60℃退火30 s，循环39次；95℃变性10 s、65℃退火5 s、终末72℃延伸10 min。以GAPDH用作内参基因，以确定每个样品和每个基因扩增的循环阈值Ct值（cycle threshold），依据2-ΔΔCt计算目的基因的相对表达量并以GAPDH基因作为内参，以待测基因GAPDH的比值作为待测基因m RNA的2-ΔΔCt相对表达量；结果的计算和分析采用Bio-Rad CFX Manager软件。