《表1 引物序列表:LPS对人牙周膜成纤维细胞中骨唾液蛋白和白细胞介素-8表达的影响的研究》

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《LPS对人牙周膜成纤维细胞中骨唾液蛋白和白细胞介素-8表达的影响的研究》


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用培养基将LPS稀释成不同浓度(0.1、1、10和50 mg/L),然后加入孔板中孵育8h进行浓度依赖性实验;选取10mg/L LPS浓度LPS加入孔板中孵育0、2、4、8、12小时,进行时间依赖性实验。实验终点时,弃去培养基,PBS清洗3遍,采用RNeasy Mini Kit和RNase-Free DNase Set试剂盒抽提细胞总RNA,检测基因浓度及完整性,经逆转录反应合成相应cDNA,以β-actin为内参基因。配制real-time PCR 20μL反应体系,进行qRT-PCR检测(反应参数均根据试剂盒使用说明),反应完成后进行扩增曲线和熔解曲线分析。引物序列见表1。