《表1 引物和探针序列:慢病毒介导的RNA干扰通过下调白细胞介素6抑制损伤后星形胶质细胞中波形蛋白的表达》
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《慢病毒介导的RNA干扰通过下调白细胞介素6抑制损伤后星形胶质细胞中波形蛋白的表达》
吸弃培养板中培养基,加0.01 mol/L PBS漂洗3 min×3次。每孔加入TRIzol溶液0.5 mL,吹打收集混悬液,提取总RNA。采用试剂盒(Vazyme Biotech,Nanjing,China)将总RNA逆转录成cDNA,置于-20℃冰箱保存备用。设计大鼠内参β-actin,Vim,IL-6的上下游引物序列和探针序列(表1),通过试剂盒(Vazyme Biotech,Nanjing,China)进行定量PCR的测量。扩增条件如下:95℃2 min,95℃20 s,52℃30 s,60℃40 s,循环45次。反应体系在Bio-Rad CFX96TM型实时荧光定量PCR仪上进行。读取Ct值,采用公式R=2-ΔΔCt计算IL-6和Vim相对表达量。
图表编号 | XD00150037900 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2020.08.25 |
作者 | 向阳、钟占琼、祝琦、吴番娜、张晓 |
绘制单位 | 江油市人民医院检验科、成都中医药大学基础医学院、成都医学院基础医学实验教学中心、成都医学院基础医学实验教学中心、成都医学院基础医学实验教学中心 |
更多格式 | 高清、无水印(增值服务) |