《表1 PCR引物序列:白细胞介素-17过表达胃癌细胞在小鼠体内的成瘤效应研究》

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《白细胞介素-17过表达胃癌细胞在小鼠体内的成瘤效应研究》


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Trizol法提取组织总RNA,用Invitrogen公司试剂盒将RNA反转录合成cDNA。应用Go Tag Green Master Mix进行PCR扩增,所使用的引物序列如表1。反应条件如下。IL-17:94℃预变性5 min;94℃、30 s,59℃、30 s、72℃、30 s,共循环31次;72℃延伸7 min。VEGF:94℃预变性5 min;94℃、30 s,59℃、30 s,72℃、30 s,共循环27次;72℃延伸7 min。Podoplanin:94℃预变性5min;94℃、30 s,58℃、30 s,72℃、30 s,共循环27次;72℃延伸7 min。β-actin:94℃预变性5min;94℃、30 s,56℃、30 s,72℃、30 s,共循环31次;72℃延伸7 min。取PCR扩增产物5μL,进行1.5%琼脂糖凝胶电泳,采用Gel-pro Analysis 3.1软件扫描,进行灰度值分析。以β-actin为内参,分析IL-17、VEGF和Podoplanin mRNA的相对表达量。