《表1 引物序列:核因子-κB/白细胞介素1β在脂多糖诱导小鼠附睾炎中的作用研究》

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《核因子-κB/白细胞介素1β在脂多糖诱导小鼠附睾炎中的作用研究》


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采用荧光定量PCR(q RT-PCR)法。取100mg附睾组织,加入Trizol试剂及氯仿提取总RNA,使用Nanodrop核酸定量仪检测提取RNA的浓度和纯度。按照Invitrogen q RT-PCR的M-MLV第一链合成系统说明书进行逆转录制备cDNA。以18S为内参在ABI7500 Fast Realtime PCR扩增仪中进行q RT-PCR扩增,以检测各组附睾组织中IL-1βmRNA的表达水平。扩增引物由上海生工公司合成,引物序列见表1。反应条件:50℃预处理2min,循环1次;95℃预变性10min,循环1次;95℃变性15s,循环40次;60℃退火30s,循环40次;72℃延伸30s,循环40次。各组均设3个复孔。以2-ΔΔCt法计算目的基因相对表达量。