《表1 PCR引物序列:中药苦参水提取物抑制Th17细胞分化的研究》

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《中药苦参水提取物抑制Th17细胞分化的研究》


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收集上述各组处理好的细胞,利用Trizol抽提细胞RNA,根据试剂盒说明书提取总RNA,测定总RNA浓度。利用TaKaRa试剂盒根据说明书逆转为cDNA,SYBR Premix Ex Taq II10μL、上下游引物各1μL、DNA模板2μL、灭菌水6μL,共20μL,混合均匀,进行逆转录。将得到的cDNA产物根据试剂盒说明书配制PCR扩增反应体系,反应条件:预变性95℃30 s;PCR反应95℃5 s;60℃30 s;72℃15 s;反应重复35个循环。以β-actin为内参,采用2-△△Ct法分析目的基因表达量。引物由生工生物工程(上海)公司合成,引物序列见表1。