《表1 PCR引物序列：持续静压力作用下内质网应激对牙周膜细胞成骨分化的影响》

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《持续静压力作用下内质网应激对牙周膜细胞成骨分化的影响》

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加载CCP后的各组hPDLCs立即使用Trizol试剂（Invitrogen Corp，Carlsbad，CA，USA）分别提取细胞总RNA，测定RNA样品纯度（A260/A280≥1.8）；反转录合成cDNA，观察不同时间PERK、eIF2α、ATF4各基因的表达情况，PCR引物序列见表1。本项研究所用引物序列由Primer Premier 5.0设计，广州思晋生物工程技术有限公司合成。取1.0μL反转录合成的cDNA在10.0μL反应体系中进行实时PCR扩增。以细胞骨架蛋白βeta-actin作为内参，通过2-ΔΔC t（ΔCt=目的基因Ct-β-肌动蛋白Ct，ΔΔCt=目的基因ΔCt-对照ΔCt，Ct为循环次数）法检测各基因mRNA相对表达量。每例样品及阴性对照均设3个平行复孔，取均值。PCR条件：95℃预变性10 min，95℃变性15 s，60℃退火60 s，循环40次。