《表1 引物序列:TAZ在张应力促进人牙周膜细胞骨向分化中的作用》

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《TAZ在张应力促进人牙周膜细胞骨向分化中的作用》


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依据TRIzol Reagent试剂盒说明,采用酚-氯仿提取法提取总RNA,取部分用于纯度测定。NanoDrop 2 000超微量分光光度计测定总RNA的浓度以及纯度(OD260 nm/OD280 nm),若两者比值介于1.8~2.0之间,则可认为纯度合格。依据PrimeScriptTM RT-PCR Kit试剂盒说明书,取20μL反应体系,用于总量为1 000 ng的总RNA的反转录过程。依据实时荧光定量PCR SYBR Green染料法的要求,设计引物(见表1)。按照试剂盒要求,采用ABI Step One Plus荧光定量PCR仪扩增cDNA模板。每个样本设3个复孔,取平均值。采用2-ΔΔCt法计算mRNA相对表达水平。