《表2 5级萃取结果:人牙周膜干细胞条件培养液对炎症组织来源牙周膜干细胞增殖及成骨分化的影响》

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《人牙周膜干细胞条件培养液对炎症组织来源牙周膜干细胞增殖及成骨分化的影响》


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条件培养液处理组和对照组的i-hPDLSCs成骨诱导2周,采用Trizol法提取细胞总RNA,以Nano Drop对所提取的RNA进行质检。用反转录试剂盒将RNA反转录成cDNA(以β-actin为内参,反转录Runx2、OPN和OCN目的基因),50℃60 min,85℃5 min,16℃10 min,合成cDNA第一链,再用Nano Drop仪器测定浓度,将其配平到50 mg/L,作为模板待用。按每孔20μL体系加入96孔板,每组重复3次,进行RT-PCR扩增。扩增条件为:95℃10 min;95℃15 s,60-64℃30 s,72℃30 s,循环25-32次;72℃延伸7 min。扩增引物序列及反应体系见表1。