《表1 引物序列：机械激活性离子通道压电蛋白Piezo1通过Notch信号通路介导牙周膜干细胞成骨分化作用机制研究》

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《机械激活性离子通道压电蛋白Piezo1通过Notch信号通路介导牙周膜干细胞成骨分化作用机制研究》

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利用胰蛋白酶收集上述各组细胞，经PBS溶液清洗3次，常温离心机1 500 r·min-1离心5 min，取沉淀，加入1 m L Trizol溶剂，提取细胞总RNA，保证RNA纯度范围为1.8～2.1，然后利用TAKARA逆转录试剂盒的要求，采用20μL反应体系逆转录为c DNA，-80℃保存，采用TAKARA荧光定量PCR试剂盒（SYBR Premix Ex TaqⅡ试剂盒）的要求，采用FTC-2000 RT-q PCR系统和50μg反应体系对样本DNA进行分析，溶解曲线确定Tm值为53.7℃，统计并记录各组样本的CT值，采用2-△△CT法对Piezo1基因和成骨基因OCN和BSP的表达进行统计。Piezo1、OCN、BSP和内参基因磷酸甘油醛脱氢酶（glyceraldehyde phosphate dehydrogenase，GAPDH）引物设计由上海生工公司设计并检测合格（表1）。