《表1 引物序列：知柏地黄汤通过调节ARE信号通路激活细胞抗氧化反应治疗阴虚火旺证的机制研究》

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《知柏地黄汤通过调节ARE信号通路激活细胞抗氧化反应治疗阴虚火旺证的机制研究》

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将HepG2细胞接种于6孔板，培养24h后予各浓度的知柏地黄汤处理24h。收集细胞并提取总RNA，逆转录cDNA后进行荧光定量PCR反应，根据基因库中β-Actin、Nrf2、Maf、Keap1的核苷酸序列设计引物，由生工生物工程（上海）股份有限公司合成，引物序列见表1。反应总体系为20μL，反应条件为：95℃变性10min，循环重复95℃变性10s，55℃复性30s，72℃合成30s，共45个循环，完成目的基因的体外扩增；65℃～97℃分析熔解曲线。每个目的基因检测设3个复孔，导出结果后以2-ΔΔCt计算目的基因相对表达量。