《表1 引物序列:丹酚酸B基于Keap1-Nrf2-ARE信号通路对血管内皮细胞EA.hy926氧化损伤的保护作用研究》

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《丹酚酸B基于Keap1-Nrf2-ARE信号通路对血管内皮细胞EA.hy926氧化损伤的保护作用研究》


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将对数生长期的EA.hy926细胞以每孔6×105个接种于6孔板中,培养24 h后,用50、100、200、400μmol·L-1的Sal B处理12 h后,弃去培养基,用PBS清洗细胞2次,每孔加入500μL的TRIzol提取总RNA,用PrimeScript RT试剂盒将1 mg的总RNA反转录为cDNA,取2μL的cDNA,加入上下游引物、酶、离子和染料等,反应条件为:95℃预变性30 s,95℃预变性5 s,60℃点火、延伸20 s,反应40个循环。以β-actin为内参,相对表达量采用2-ΔΔCt法分析目的基因HO-1、NQO1、Nrf2的相对表达量。引物序列见下表: