《表1 化合物4～7, 9, 11对缺氧损伤EA.hy926血管内皮细胞代谢活力的影响 (x珋±s, n=6)》

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《北豆根中化学成分及其抗缺氧活性研究》

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注:与正常对照组相比1) P<0.01；与缺氧模型组相比2) P<0.01；与维拉帕米组相比3) P<0.05，4) P<0.01。

取对数生长期的EA.hy926血管内皮细胞消化并计数，调整细胞浓度为5×104个/m L，接种于96孔板中，每孔加入200μL，于5%CO2，37℃培养24h，然后换为无血清DMEM培养基继续培养12 h。将细胞随机分为正常对照组、缺氧模型组、待测药物组（浓度均为1×10-7mol·L-1）和阳性药对照组（维拉帕米，浓度为1×10-7mol·L-1），每组设6个复孔。正常对照组换为无血清高糖DMEM培养基，置于5%CO2培养箱中37℃正常培养2 h；其余各组以预缺氧30 min的D-Hanks液代替培养基，加入相应浓度药物后，在三气培养箱（5%CO2，95%N2，37℃）中缺氧培养2 h。培养结束后，各组每孔均加入5 g·L-1MTT溶液20μL，置于CO2培养箱37℃继续培养4 h，弃去上清液，每孔加入150μL DMSO，摇床振荡10 min至结晶完全溶解，在酶标仪490 nm波长下测定各孔的吸光度，以正常对照组的吸光度作对照来计算药物对缺氧损伤EA.hy926血管内皮细胞的保护作用，实验结果见表1。