《表1 引物序列：丹酚酸B对成骨细胞氧化损伤的保护作用》

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《丹酚酸B对成骨细胞氧化损伤的保护作用》

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将MC3T3-E1细胞以6×105个细胞/孔的密度接种在6孔板中。采用Trizol试剂提取各组细胞样本的总RNA，通过OD280/OD260比值来测定其纯度，比值在1.8～2.0为合格。使用带有gDNA Eraser的PrimeScript RT试剂盒，用1 mg RNA进行c DNA合成。使用表1中列出的基因特异性引物扩增cDNA。按照TB Green Premix Ex Taq试剂盒的操作说明进行30个循环的扩增，包括：94℃（变性），60℃（退火）和72℃（延伸）各1 min。每个cDNA样本设2个复孔，实时监测每个反应的循环荧光信号，获得循环阈值（cycle threshold，Ct）。然后根据目的基因和管家基因的Ct值，通过相对定量方法2-△△Ct进行统计分析。每个样本重复测试3次，取平均值。