《表1 引物序列:氢气对CO_2气腹致大鼠肾脏损伤的保护作用及相关机制研究》

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《氢气对CO_2气腹致大鼠肾脏损伤的保护作用及相关机制研究》


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采用qRT-PCR方法开展基因水平检测。Trizol试剂从肾脏中提取总RNA,使用PrieScriptTMRT试剂盒将其反转录为cDNA。根据产品说明书,使用SYBR?Premix Ex Taq?Ⅱ,在LightCycler 2.0中实时定量PCR。具体引物(见表1)由TaKaRa合成。反应参数如下:95℃持续30 s,45个循环在95℃持续5 s,引物特异性退火温度持续20 s,并在72℃延伸20 s。使用2-ΔΔCt方法分析相对mRNA表达。