《表1 引物序列:铁皮石斛水溶性总蛋白对大鼠胃黏膜损伤及炎症反应的保护机制研究》

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《铁皮石斛水溶性总蛋白对大鼠胃黏膜损伤及炎症反应的保护机制研究》


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取适量胃组织,放入用放入用焦碳酸二乙酯(diethyl pyrocarbonate,DEPC)处理并经过高温高压灭菌过的水浸泡过夜的预冷研钵中,加入液氮小心研磨至无肉眼可见组织块,加入1 mL Trizol提取RNA,测定浓度后,根据反转录试剂盒说明书操作,将其反转录为cDNA。将cDNA稀释适当倍数后,取2.5μL,加入到含SYBR Premix Ex Taq TMⅡ(2×)12.5μL、双蒸水8μL、上下游引物各1μL的体系中。反应条件:95℃预变性30 s、95℃变性5 s、退火30 s、72℃延伸20 s,40个循环[14]。反应后绘制扩增曲线,对目的基因扩增后产物的表达量与β-Actin扩增后表达量的比值进行结果分析。引物序列见表1。