《表1 引物序列：GABA及其受体在心肌梗死缺血再灌注损伤中的心肌保护机制研究》

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《GABA及其受体在心肌梗死缺血再灌注损伤中的心肌保护机制研究》

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按实验分组给予相应处理后，提取心肌细胞总RNA，反转录合成c DNA。采用SYBR两步法行PCR扩增。反应条件设为:95℃2 min，95℃变性15 s，60℃延伸退火60 s，总共40个循环。采用Trizol法（Invitrogen）提取总RNA，Takara逆转录试剂盒（DRR037A）提取c DNA，样品储存于-20℃备用。引物的设计采用Primer Premier 5.0和oligo 7软件相结合的方法，设计的引物含跨内含子，并经Nucleotide basic local alignment search tool （BLAST）验证特异性良好。引物的由Invitrogen公司合成。引物序列参见表1。c DNA样品使用Takara公司SYBRPremix Ex Taq （Tli RNase H Plus）试剂盒，在ABI7900HT fast real-time PCR System进行扩增检测。参照基因为18S rRNA，ΔCT=CT目的基因/CT参照基因，相对表达量=2-ΔCT。