《表1.引物序列:雌激素受体GPER通过抑制内质网应激减轻脑缺血再灌注损伤》

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《雌激素受体GPER通过抑制内质网应激减轻脑缺血再灌注损伤》


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同1.10节取大鼠缺血半球海马组织,采用QIAGEN试剂盒提取总RNA,反转录为c DNA(RNeasy Mini Kit试剂盒,德国QIAGEN公司)。以c DNA为模板,进行real-time PCR反应,扩增靶基因和内参。目的基因为GRP78、Caspase-12、CHOP,内参基因为β-actin,反应体系及条件参照已发表文献[31],反应完成后利用仪器分析软件,用2–ΔΔCt法进行分析。引物序列见表1。Real-time PCR反应条件设置参数:94°C预变性3 min,94°C变性30 s,72°C延伸1 min,循环40次;最后55°C反应5 min,终止延伸。