《表1 PCR引物序列:地黄饮子对脑缺血再灌注损伤大鼠保护作用及其机制》
PCR检测大鼠SVZ的Notch1,Jagged1,Hes1 mRNA表达术后第28天取各组大鼠脑组织快速放入液氮保存。实验时分离侧脑室室管膜下区组织0.1 g,按照trizol试剂盒提取总RNA,紫外分光光度计和电泳测定其含量、纯度及质量。将mRNA逆转录为cDNA,反应条件为25℃10 min,50℃30 min,85℃5 min。采用Primer Premier 6.0和Beacon designer 7.8软件进行定量PCR引物设计(表1),由生工生物工程(上海)股份有限公司负责合成。95℃预变性1 min,放入荧光定量PCR仪扩增,共进行40个循环(95℃15 s,63℃25 s)。反应完成后作熔点曲线分析,以β-肌动蛋白(β-actin)作为内参基因,采用2-ΔΔCt法[25]计算mRNA的相对表达量。
图表编号 | XD0048837500 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2019.02.20 |
作者 | 王俊杰、楼琦、汤娟娟、白亚平、李倩、张培璐、杜月光 |
绘制单位 | 浙江中医药大学、浙江省医学科学院、浙江中医药大学、浙江中医药大学、浙江中医药大学、浙江中医药大学、浙江中医药大学 |
更多格式 | 高清、无水印(增值服务) |