《表1 引物序列：葡萄糖酸锌碳点在细胞成像和体外促进成骨分化中的作用》

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《葡萄糖酸锌碳点在细胞成像和体外促进成骨分化中的作用》

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将实验分为空白对照组和不同浓度（0.01、0.10、1.00、10.00和100.00mg·L-1）Zn-CDs组。各组均采用成骨诱导液（含10 mmol·L-1β-甘油磷酸钠、100 nmol·L-1地塞米松和50mg·L-1抗坏血酸）诱导，每3d更换1次。应用RNA提取试剂盒分别于诱导第3和7天提取细胞总RNA，采用NanoDrop 1000spectrophotometer检测所提取RNA浓度。按照PrimerScript○R RT Reagent Kit说明书将所提取RNA逆转录为cDNA，最后采用qRT-PCR检测MC3T3-E1细胞中成骨分化标志Runt相关转录因子2（Runt-relateed transcription factor-2，Runx2）、碱性磷酸酶（alkaline phosphatase，ALP）和骨钙素（osteocalcin，OC）的mRNA表达水平（β-actin为内参）。引物序列见表1，具体操作按照试剂盒说明书进行。采用2-ΔΔCt方法计算MC3T3-E1细胞中Runx2、ALP和OC mRNA相对表达水平。