《表1 引物序列:Exendin-4通过激活Nrf2/HO-1通路减轻糖尿病小鼠的肝脏氧化应激及纤维化》

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《Exendin-4通过激活Nrf2/HO-1通路减轻糖尿病小鼠的肝脏氧化应激及纤维化》


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Trizol法提取小鼠肝脏组织的总RNA,应用ND-1000分光光度计(USA)测定RNA的纯度和浓度。根据反转录试剂盒说明书将总RNA反转录成cDNA,再以cDNA为模板进行目的基因的扩增。反应条件:预变性95℃30 s;PCR反应95℃5 s,60℃34 s,总共40个循环。结果以2-△△Ct方法分析基因的表达差异。以Actin为内参,计算目的基因的mRNA相对表达量。引物序列如表1,包括脂质代谢相关基因:过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)、脂肪酸合成酶(FAS)、乙酰辅酶A羧化酶α(ACCα)、甾醇调节元件结合转录因子1(SREBP-1c)、过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPARα)、硬脂酰辅酶A去饱和酶1(Scd-1),纤维化相关基因:转化生长因子β1(TGF-β1)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、胶原蛋白I(collagen-I,Col-I),氧化应激相关基因:NADPH氧化酶4(NOX4)、超氧化物歧化酶1(SOD1)、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)、血红素加氧酶-1(HO-1)和核因子红细胞2相关因子2(Nrf2)。