《表1 引物序列:尾加压素Ⅱ对大鼠心肌细胞氧化应激/内质网应激及其相关信号通路的影响》

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《尾加压素Ⅱ对大鼠心肌细胞氧化应激/内质网应激及其相关信号通路的影响》


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注:ATF6:活性转录因子6;GRP78:葡萄糖调节蛋白78;CHOP:细胞凋亡信号分子CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白;caspase-12:半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶12;GAPDH:3-磷酸甘油醛脱氢酶

实时荧光定量PCR检测:按说明用TRIzol提取心肌细胞总RNA,并用紫外分光光度计在260 nm下测量并计算RNA的浓度及纯度。根据TAKaRa逆转录试剂盒说明,将RNA逆转录为c DNA,并按2μl引物(10μmol),1μl cDNA,8μl 2×Taq PCR Master Mix,12μl ddH2O,总反应体积25μl的反应体系、反应条件95℃,30 s。采用Promega的SYBR?GreenⅠ在荧光定量PCR仪上扩增,建立标准曲线,反应步骤:95℃,10 s,35个循环,62℃退火10 s;72℃延伸10 s进行PCR扩增,在每个循环的延伸期收集荧光信号,并通过熔解曲线分析PCR扩增的特异性。所获数据通过2-ΔΔCt法进行处理。引物序列见表1。