《表1 引物序列:当归对氧化应激损伤的大鼠髓核细胞增殖和胞外基质合成的影响》

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《当归对氧化应激损伤的大鼠髓核细胞增殖和胞外基质合成的影响》


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按照RNAiso Plus试剂说明书操作,提取各组细胞的总RNA,用琼脂糖凝胶电泳检测RNA的完整性,用NanoDrop2000检测RNA的浓度和纯度。使用反转录试剂盒将RNA反转录成c DNA,然后按照UltraSYBR Mixture说明书加入各试剂,进行Real-time PCR操作。反应体系:UltraSYBR Mixture 12.5μL,上、下游引物各1μL,c DNA模板1μL,ddH2O 9.5μL。反应条件:95℃预变性10 min;95℃变性15 s,60℃退火/延伸1 min,40个循环。以GAPDH为内参,使用公式2-ΔΔCt计算目的基因的相对表达量。引物序列见表1。