《表1 所用引物序列:青砖茶水提物对高脂饮食诱导的小鼠肥胖及氧化应激的作用及机制研究》

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《青砖茶水提物对高脂饮食诱导的小鼠肥胖及氧化应激的作用及机制研究》


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注:Nrf2:转录因子核因子E2相关因子2;HO-1:血红素加氧酶-1;GST:谷胱甘肽S-转移酶;γ-GCL:γ-谷氨酰半胱氨酸连接酶;NQO-1:磷酸酰胺腺嘌呤二核苷酸醌氧化还原酶-1

实时荧光定量PCR采用Trizol一步法提取组织总RNA,用紫外分光光度仪测量RNA的纯度和浓度,其中A260/A280比值在1.8~2.1。取1μg总RNA,用Prime Script TM Reagent Kit反转录合成cDNA。将cDNA模板(1μL) ,SYBR Green Master Mix(日本Takara公司),上游引物与下游引物,加入到PCR系统中,总体积为25μL,用Agilent statagene Mx3000P实时荧光定量PCR仪进行检测,所有引物序列见表1。PCR条件为:95℃×5min,95℃×30s,60℃×1min,72℃×1min,共40个循环。绘制溶解曲线,最终数据采用2-ΔΔCt法进行分析。各基因的表达水平以β-actin为内参进行标准化。