《表1 PCR引物序列:双酚S对高脂饮食斑马鱼脂代谢的影响及机制》

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《双酚S对高脂饮食斑马鱼脂代谢的影响及机制》


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将5 dpf的野生型斑马鱼连续喂养5%胆固醇饲料10 d,每天喂食2次,每次35 mg/皿,每皿30条幼鱼,每个BPS暴露浓度设置3个平行组。暴露后收集20条幼鱼作为1个样本储存于-80℃冰箱待用。组织样本的处理方法:按组织重量(g)∶体积(mL)=1∶9的比例加入9倍体积的生理盐水于冰上进行机械匀浆,然后将匀浆液置于离心机5 000 g,离心10 min,取上清液于新的离心管中。用ELISA检测法测定脂代谢相关蛋白PPARγ和RXRα。重复同样的暴露实验和组织样品处理方法,收集20条幼鱼作为1个样本,使用RNA提取试剂盒和逆转录试剂盒提取每个样本的总RNA。用q RT-PCR分析胆固醇代谢相关基因和脂质代谢相关通路基因hmgcrα、ldlrα、pparγ、rxrα和rorα的相对表达量。rp113α为内参基因,各基因的引物序列如表1。