《表1 PCR引物序列及产物长度》

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《豨莶草醇提物调控TLRs/NF-κB通路及NLRP3炎症小体干预痛风性关节炎的机制研究》


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收集各组细胞,按照TRIzol Reagent说明书提取RNA,测定RNA纯度及浓度,A260/A280比值为1.8~2.0。按逆转录试剂盒说明书合成cDNA,反应条件:42℃2 min,37℃15 min,85℃5 s;cDNA储存于-20℃。再以cDNA为模板,各样本基因检测按10μL体系进行PCR反应。反应条件:95℃预变性30 s、95℃变性5 s、55℃退火30 s、72℃延伸30 s,40个循环。以GAPDH作为内参基因,采用2-ΔΔCt法计算各组间mRNA表达水平差异;实验重复3次。RT-PCR检测引物由生工生物工程(上海)股份有限公司合成,引物序列见表1。