《表1 PCR引物序列及产物长度》

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《Genistein对雌性大鼠卵巢颗粒细胞FSHR基因表达的影响》

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采用RT-PCR法检测FSHR基因mRNA表达。采用Trizol提取细胞总RNA，逆转录按BcaBESTTMRNA PCR Kit说明书操作。通过Gene Runner软件设计引物，以β-actin作为内参。引物的序列和产物长度见表1。PCR反应的扩增条件为94℃预变性1 min，94℃变性4 min，60℃退火1 min，72℃延伸1 min，循环次数为35次，72℃充分延伸10 min。产物于1.5%的琼脂糖凝胶中进行电泳，凝胶成像系统扫描后进行条带灰度分析，以FSHR基因与β-actin灰度比值代表前者相对表达量。实验重复3次。