《表2 定量PCR引物序列及产物长度》

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《牦牛TSHB、DIO2和DIO3基因的克隆及其在繁殖轴的表达研究》


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根据已克隆出的牦牛TSHB、DIO2、DIO3基因序列设计实时荧光定量PCR引物(表2),内参基因选用GAPDH,检测各基因表达量。反应总体系为20μL:Green Supermix 10μL、上下游引物各0.5μL、cDNA模板1μL、ddH2O 8μL。反应条件为:预变性95℃2 min;变性95℃10 s,退火58℃30 s,延伸72℃30 s,40个循环,每个样品重复检测3次。