《表1 荧光定量PCR引物序列及扩增长度》

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《基于AMPK-FoxO3a-MnSOD信号通路探讨类风湿关节炎患者氧化应激的机制及黄芩清热除痹胶囊对其影响》

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采用Trizol法提取细胞的总RNA，并用反转录试剂盒反转录为cDNA后，进行RT-PCR。在0.2 ml EP管中加入总RNA（质量为1μg）、10μmol/L Oligo（dT）1μl、DEPC水补足至12μl，轻轻混匀、点动离心。PCR仪上65℃加热5 min，立即冰浴3 min。在上述EP管中加入5×Reaction Buffer 4.0μl、10 mmol/L d NTP Mix 2μl、RibolockTMRNase inhibitor1μl、RevertAidTMM-MuLV Reverse Transcniptase 1μl。42℃60 min，70℃5 min。取出上述反应液，即为cDNA，-80℃保存备用。每组样品进行PCR反应时，用β-actin作为内参照，用同一样品的cDNA和同样的PCR反应条件进行扩增，扩增条件为95℃预变性2 min，然后按下列循环条件进行扩增，95℃变性5s，退火60℃10 s，循环40次。