《表1 荧光定量PCR扩增基因引物序列》

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《骨碎补总黄酮通过SDF1/CXCR4信号途径促进小鼠骨髓基质细胞ST-2迁移》

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使用不同浓度的AFRD(5、20、50、100 mg/L）干预ST-2细胞48h，使用细胞提取RNA，逆转录获得cDNA单链，逆转录条件为25℃10 min，37℃30 min，42℃30 min，85℃5 min。逆转录具体操作步骤按Applied Biosystems公司TaqMan Reverse Transcription Reagents试剂盒说明书进行。以cDNA为模板，GAPDH作为内参基因，荧光定量PCR检测SDF1和CXCR4的mRNA表达。反应条件：95℃预变性10 min；95℃变性10 s，60℃退火10 s，共45个循环。每组设置3个复孔，目的基因相对表达量用2-ΔΔCt计算。荧光定量PCR扩增的基因引物序列见表1。