《表1 靶基因PCR引物序列和目的产物长度及退火温度》

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《鲍氏不动杆菌对碳青霉烯类抗菌药物的耐药机制研究》

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加热煮沸法制备DNA模板，采用PCR法检测10种β-内酰胺酶基因和carO、oprD膜孔道蛋白基因，adeB外排泵基因。参照文献[5]设计引物，靶基因引物序列和目的产物长度及退火温度，见表1，引物由上海英潍捷基公司合成。MyG-enie96PCR仪（韩国BIONEER）反应体系共25μl，包括2×Taq PCR Master Mix 12.5μl，上、下游引物各1μl，DNA模板1.5μl，ddH2O 9μl。反应参数:94℃预变性5min，然后94℃30s→退火温度30s→72℃60s，循环30周期，最后72℃延伸7min。扩增产物经2%琼脂糖凝胶电泳，在紫外凝胶电泳成像仪（美国Phalmger）下观察结果。