《表1 耐药基因引物序列、产物长度和退火温度》

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《宁夏某医院耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌临床分布及分子机制研究》

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将收集的每株CRE菌株同时进行改良碳青霉烯酶灭活（mCIM）试验和乙二胺四乙酸-碳青霉烯酶灭活（eCIM）试验联合检测。其中当mCIM试验结果为阳性时eCIM试验结果才有意义；当mCIM试验结果为阴性时，eCIM试验结果不作解释，具体方法及结果判读标准参照CLSI 2018年文件标准。采用煮沸法提取菌株DNA模板，通过参照相关文献报道及NCBI网站设计并由生工生物工程（上海）股份有限公司合成引物，详见表1。对常见的耐药基因ESBLs(blaSHV、blaTEM）、碳青霉烯酶（blaKPC、blaNDM、blaVIM、blaIMP、blaOXA-48）进行PCR扩增。PCR产物送生工生物工程（上海）股份有限公司测序。其中，基因型KPC、NDM阳性对照菌分别为本研究中经测序确认耐药基因的7、27号菌，基因型SHV、TEM、OXA-48的阳性对照菌为31号菌，阴性对照均为质控菌大肠埃希菌ATCC 25922。