《表1 PCR引物列表:白细胞介素-35基因多态性与冠心病患者认知功能障碍的相关性研究》

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《白细胞介素-35基因多态性与冠心病患者认知功能障碍的相关性研究》


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使用Sequenom Mass Array系统对所研究SNP位点进行基因分型。各位点引物序列见表1。PCR反应体系:PCR反应缓冲液(5 mmol/L MgCl20.325μL、15 mmol/L MgCl20.625μL、25 mmol/L dNTP 0.100μL),二次蒸馏去离子纯净水1.850μL,500 nmol/L引物混合物1.000μL,5 U/μL HotStarTaq 0.100μL,DNA样本1μL。PCR扩增程序:94℃5min;94℃20 s,56℃30 s,72℃1 min,45个循环;72℃3min,4℃至终止。然后加入SAP Mix反应液,继续40个循环:94℃30 s;94℃5 s,52℃5 s,80℃5 s;72℃3 min,4℃至终止,使用MALDI-TOF质谱仪分析树脂纯化后的反应产物。