《表1 引物及探针序列表：基于Taqman荧光ARMS-PCR技术检测CYP3A5基因多态性方法的建立》

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《基于Taqman荧光ARMS-PCR技术检测CYP3A5基因多态性方法的建立》

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根据NCBI数据库提供的CYP3A5*3(rs776746）等位基因序列（https：//www.ncbi.nlm.nih.gov/projects/SNP/snp＿ref.cgi?do＿not＿redirect&rs=rs776746）及内参基因GAPDH的序列（https：//www.ncbi.nlm.nih.gov/nucleotide/AY340484.1?report=genbank&log$=nuclalign&blast＿rank=86&RID=M24C6HSE01N；GeneBank序列号：AY340484.1），采用Primer premier 5.0设计Taqman荧光PCR特异性扩增引物和探针，产物长度为80～150 bp左右。为了提高ARMS-PCR引物的特异性，在CYP3A5*3和CYP3A5*1检测上游引物3′端SNP位点的临近位置引入错配核苷酸，如表1中加粗斜体字母所示。检测CYP3A5*3等位基因的Taqman探针5′端采用FAM荧光报告基团进行标记，3′采用BHQ1荧光淬灭基团进行标记。检测内参基因GAPDH的Taqman探针5′端采用VIC荧光报告基团进行标记，3′端采用BHQ1荧光淬灭基团进行标记。同时采用Primer premier 5.0设计CYP3A5*3的金标准Sanger测序引物，产物长度为300～400 bp。引物和探针均由上海生工生物股份有限公司合成。具体序列特征和探针标记见表1。