《表1 引物序列：人凝血因子IX基因在小鼠脂肪干细胞中的稳定表达》

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《人凝血因子IX基因在小鼠脂肪干细胞中的稳定表达》

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依据实验分组，A组细胞转染后72 h，B、C、D组待细胞长满细胞瓶，应用TRIzol法提取细胞总RNA。RNA提取后，测定RNA纯度及浓度测定。样品合格后，取1μg提取RNA根据试剂盒说明书进行逆转录合成。依据TaKaRa逆转录试剂说明书，逆转录条件为37℃15 min，85℃5 s，4℃forever。以逆转录产物行PCR，根据小鼠GAPDH（179 bp）为内参，F9（118 bp）的基因序列设计引物（表1），引物送至英潍捷基（上海）贸易有限公司Invitrogen合成。再行PCR扩增特异序列，PCR反应条件:94℃3 min，94℃30 s，60℃45 s，72℃1min，72℃5 min，30个循环。PCR产物行琼脂糖凝胶电泳鉴定。