《表1 PCR引物序列:肥胖小鼠脂肪组织中炎症因子的表达》

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《肥胖小鼠脂肪组织中炎症因子的表达》


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采用Real-time PCR方法检测脂肪组织中CC-趋化因子配体2(CC chemokine Iigand 2,CCL2)、CD44、集落刺激因子2(colony stimulating factor 2,CSF2)、胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)、Iba1、白细胞介素(interleukin,IL)-1家族(IL-1α、IL-6、IL-7)、JUN和S100βmRNA表达水平。取每组5只小鼠,颈椎脱臼处死后分别取右侧eWAT、ingWAT和BAT,液氮充分研磨组织。用Trizol和氯仿提取总RNA,通过5×All-In-One RT Mastermix反转录得到cDNA,使用EvaGreen 2×Real-time PCR Mastermix进行Real-time PCR反应,β-actin为内参,引物序列如表1所示。将定量结果标准化,并根据2-△△Ct的公式计算。