《表1 PCR引物序列：穿龙薯蓣皂苷对再生障碍性贫血小鼠PPARγ,C/EBPα及脂肪分泌因子表达的影响》

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《"穿龙薯蓣皂苷对再生障碍性贫血小鼠PPARγ,C/EBPα及脂肪分泌因子表达的影响"》

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PCR检测各组小鼠BMMSCs PPARγ，C/EBPα，Adiponectin，Leptin mRNA表达取各组经成脂化体系诱导的小鼠BMMSCs，无菌PBS洗涤3次，留细胞团加入trizol，手动混匀使细胞变性裂解，加入三氯甲烷混匀静置2～3 min，4℃条件下12 000 r·min-1离心15 min，取上层水相置于新离心管，加等体积异丙醇静置10 min，4℃条件下12 000 r·min-1离心10 min。弃上清，加80%乙醇，4℃条件下1万r·min-1离心10 min。室温风干沉淀，加入DEPC水20μL溶解沉淀，计算A260/A280值在1.8～2.0。取RNA 1μg按逆转录试剂盒说明合成cDNA。PCR扩增体系20μL，目的基因引物序列见表1，扩增条件为94℃预变性5 min，94℃变性30 s，56～59℃退火30 s，72℃延伸30 s，共40个循环。以β-肌动蛋白（β-actin）作为内参，引物序列均由生工生物工程（上海）股份有限公司合成，采用2-ΔΔCt法对目的基因进行相对定量分析。