《表1 PCR引物序列:膀胱癌组织中色素上皮衍生因子与雄激素受体的表达及其相关性》

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《膀胱癌组织中色素上皮衍生因子与雄激素受体的表达及其相关性》


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收集转染后48 h的细胞,利用TRIzol试剂从不同实验组细胞系中提取总RNA,根据反转录试剂盒说明书将RNA(1μg)反转录成cDNA。根据NCBI数据库设计基因PEDF和AR的定量引物,引物序列见表1。以GAPDH基因作为内参,利用SYBR Green实时定量PCR染料法对相关基因的表达进行分析。按照2-ΔΔCT法计算和分析各基因的表达水平。反应体积为25μl,反应条件:94℃2min;94℃1 min,56℃1 min,72℃1 min,40个循环;72℃5 min延伸。每个样品取样3次,每次设置3个重复。实验重复3次。