《表1 引物序列:息肉状脉络膜血管病变患者房水中IL-8及其受体的表达》

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《息肉状脉络膜血管病变患者房水中IL-8及其受体的表达》


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房水中IL-8、CXCR1、CXCR2表达参照RNA提取试剂盒(美国Thermo Fisher Scientific)说明书提取房水总RNA,并反转录为c DNA,用Primer3软件设计荧光定量PCR引物,见表1。反应体系(20μL):2×SYBR Mix 10μL,10倍稀释c DNA 1μL,上下游引物各0.5μL,H2O 8μL。每个样品设置3个重复孔。在Rotor-Gene3000 real-time PCR仪(德国QIAGEN公司,型号:Rotor-Gene Q)上进行反应,程序设定为:95℃预变性10s,95℃10s,62℃20s,72℃2min,共35个循环。反应结束后保存数据,利用仪器自带软件分析数据,采用2-ΔΔCt法计算IL-8、CXCR1、CXCR2 m RNA相对表达量。