《表2 各引物序列信息：食管鳞状细胞癌患者miR-142-5p的表达及其临床意义》

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《食管鳞状细胞癌患者miR-142-5p的表达及其临床意义》

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按照ABI公司的Taq ManMicroRNA Reverse Transcription kit试剂盒操作说明书，对抽提的RNA进行体外反转录实验，得到cDNA产物；反应条件为:16℃，孵育30 min，42℃孵育30 min，85℃加热5 min，4℃保存。以得到的cDNA为模版，进行荧光定量PCR。采用Taq ManUniversal PCR Master Mix20μL反应体系，在罗氏LightCycler480仪器上操作，以U6作为表达检测的内参，ΔCt表示miR-142-5p的相对表达量，其中ΔCt=CtU6-CtmiR-142-5p，反应条件为:95℃，预变性10 min；95℃15 s，60℃30 s，70℃30 s进行40个循环的扩增，引物信息见表2。检测癌组织与癌旁组织的miR-142-5p的表达，与癌旁组织表达相比降低，称之为相对低表达。