《表1 引物序列表：宫颈鳞癌患者血清miR-1246的表达及其临床意义》

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《宫颈鳞癌患者血清miR-1246的表达及其临床意义》

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血清提取按照miRNeasy Serum/Plasma Kit试剂盒提取总RNA，严格遵循操作步骤及注意事项。从血清中提取总RNA并检测了RNA的纯度，OD260/OD280:1.8～2.1。cDNA的制备采用反转录试剂盒，取约3.75μl总RNA，依照宝生物工程（大连）有限公司的反转录酶及产品说明书，按反应条件37℃1 h，85℃5 min进行反转录。反转录产物置于-20℃条件下保存。行RT-q PCR检测，扩增体系为25μl，其中SYBR荧光染料预混液（2×）12.5μl，无酶水9.5μl，c DNA模板2μl，上下游引物各0.5μl。引物序列见表1。反应条件为:95℃10 s、95℃5 s、60℃20 s（最后两步共计40个循环）。以管家基因U6为内参，所有样品设三个复孔，取Ct平均值。