《表1 PCR引物序列:miR-503靶向ERCC1抑制食管鳞状细胞癌放疗抵抗作用的机制》

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《miR-503靶向ERCC1抑制食管鳞状细胞癌放疗抵抗作用的机制》


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采用TRIzol一步法提取总RNA,并取2μg总RNA反转录为cDNA。以U6为内参(引物序列见表1,F:正向引物;R:反向引物),按SYBR Green实时PCR试剂盒说明建立终体积为20μl的PCR反应体系。PCR热循环参数为:95℃、5 min,然后3步反应:94℃变性30 s,60℃退火30 s,72℃延伸30 s,进行45个循环。检测结果采用2-ΔΔCt法进行计算。