《表1 引物名称及序列:维甲酸诱导基因I在DSS诱导的慢性肠炎小鼠结肠组织中的表达》

《表1 引物名称及序列:维甲酸诱导基因I在DSS诱导的慢性肠炎小鼠结肠组织中的表达》   提示:宽带有限、当前游客访问压缩模式
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《维甲酸诱导基因I在DSS诱导的慢性肠炎小鼠结肠组织中的表达》


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采用Trizol法提取小鼠结肠组织总RNA,测定RNA纯度和浓度后取RNA 2μg,逆转录合成c DNA,置于-20℃冰箱保存。冰上配制PCR反应体系(共25μL):SYBR Premix EX TaqⅡ(×2)12.5μL,上下游引物各1μL(浓度10μmol/L),RNase-Free水8.5μL,c DNA 2μL。每个样本设3个复孔。PCR反应条件:95℃预变性30 s;95℃变性5 s;根据引物Tm值设置退火温度,退火时长30 s,72℃延伸30 s,共40个循环。以β-actin作为内参基因,采用2-ΔΔCt法计算各指标mRNA相对表达量。引物由上海生工生物工程公司设计并合成(表1)。