《表1 引物序列：玉米ZmWRKY53基因克隆及诱导表达分析》

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《玉米ZmWRKY53基因克隆及诱导表达分析》

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依据玉米抗旱转录组数据库分析结果（Min et al.，2016），选取表达差异的一个WRKY转录因子Unigene序列，经同源比对，命名为ZmWRKY53。根据基因序列设计扩增该基因的全长序列的引物（表1）。使用PrimeSTAR Max DNA Polymerase（TaKaRa，大连，中国）高保证酶对目的基因进行PCR扩增，反应体系为：1.0μL的cDNA模板，PrimeSTAR Max Premix（2×）25μL，上下游引物（10μmol/L）各2.0μL，总反应体系为50μL。PCR反应条件为，首先98℃预变性5 min，35个扩增循环主要包括98℃变性10 s，57℃退火5 s，72℃延伸10 s，最后72℃总延伸10 min。取PCR产物在含EB的1.2%琼脂糖凝胶上进行电泳，回收产物与pMD19-T载体（TaKaRa，大连，中国）连接，转入DH5α，验证阳性克隆后送往生工生物工程（上海）股份有限公司测序。