《表1 所用引物序列：桑黄HMGS基因克隆、分子特性及差异表达分析》

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《桑黄HMGS基因克隆、分子特性及差异表达分析》

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搜索网上已知数据库中HMGS基因，与本实验室测得的桑黄转录组数据进行比对，仅检测到1个HMGS基因片段，Unigene28750[15]，根据其设计引物HF1和HR1（表1）；以反转录后cDNA为模板进行PCR扩增，50μL反应体系：ddH2O 34.5μL、10×PCR缓冲液5μL、dNTP（2.5 mmol/L）4μL、引物HF1、HR1（10μmol/L）各2μL、cDNA模板2μL和Taq DNA polymerase(5 U/μL）0.5μL。PCR扩增条件：94℃预变性5 min；94℃、30 s、58℃、30 s、72℃、40 s，35个循环；最后72℃延伸10min，4℃结束。将获得的PCR产物经1%琼脂糖凝胶电泳后，用DNA胶回收试剂盒纯化回收，连入pMD18-T载体，转化大肠杆菌DH5α感受态，并进行蓝白斑筛选，将获得带有目的产物的阳性克隆质粒进行测序，测序由哈尔滨博仕公司完成。