《表1 RcSOD基因克隆及表达分析所用引物序列》

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《砂藓抗旱相关基因RcSOD的克隆及表达分析》


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使用处理后砂藓的cDNA第一条链作为qPCR模板。根据RcSOD基因CDS序列,设计引物RcSOD_CDS_F、RcSOD_CDS_R(表1),选择砂藓18S rRNA基因作为内参基因,设计引物18S-F、18S-R(表1)。qPCR反应体系(20μL):cDNA(100μg/μL)1μL,上下游引物(10μmol/L)各1μL,SsoFastTMEvagreen誖Supermix 10μL,ddH2O 7μL。反应条件:95℃5 min;95℃10 s;60℃30 s,42循环;每个样品反应重复3次,利用双标曲法(Ma et al.,2014)计算基因的相对表达量,使用SPSS软件的LSD算法(信雨萌等,2018)进行单因素方差分析。