《表1 所用引物序列:中华鳖Gper基因克隆、表达及其在精巢中的功能》

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《中华鳖Gper基因克隆、表达及其在精巢中的功能》


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将大小均一的雄鳖(300~350 g)进行腹腔注射,一部分进行Letrozole(索莱宝,中国)处理,另一部分用于G-15(APEXBIO,美国)处理。两组处理分别设置对照组、低浓度处理组和高浓度处理组(n=5)。将Letrozole和G-15分别溶于DMSO(索莱宝,中国),–20℃保存,注射前用生理盐水进行稀释,DMSO∶生理盐水=1∶19。Letrozole实验组低浓度注射剂量为5 mg/kg,高浓度为10 mg/kg。G-15实验组低浓度注射剂量为0.5 mg/kg,高浓度为1 mg/kg。对照组注射相同体积的溶剂。实验同时进行,中华鳖每周注射一次,共注射4次。处理结束后分别取中华鳖睾丸,–80℃保存。按照1.4方法提取总RNA,反转录合成cDNA进行qRT-PCR。相关基因引物根据NCBI数据库中华鳖基因组序列设计(表1)。