《表1 引物序列：TrMYB308基因的克隆及在苦荞毛状根中的功能分析》

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《TrMYB308基因的克隆及在苦荞毛状根中的功能分析》

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实时荧光定量PCR：分别以白三叶组成型表达的TrActin基因和荞麦组成型表达的FtH3基因为内参；设计基因特异引物，以制备好的cDNA为模板，qPCR反应体系：ChamQTM SYBR?qPCR Master Mix 10.0μL，PCR Forward Primer（10 mol/L）0.4μL，PCR Reverse Primer（10 mol/L）0.4μL，c DNA模板1.0μL，补水至20μL。qRT-PCR程序：95℃2 min，95℃15 s，60℃30 s，72℃20 s，40个循环。每个样品重复测定3次，在BAI 7500 Realtime PCR仪上进行qRT-PCR检测。本试验中用RQ（相对表达量）=2-ΔΔCT的算法，计算目标基因的相对表达量；设置诱导表达0 h的2-ΔΔCT值为1，计算出1、4、8和12 h的表达倍数。实时荧光定量PCR的引物详见表1。